重量平衡在离心中非常重要。离心机的转头在高速运动中有-的动态能量。如果没有正确平衡好,整个离心单位会脱离它所在的位置,造成-的损害。
一旦您确定转头和盖子都固定好了,就可开始离心,在速度达到您设定的转速前不要离开。如果您发现问题,找一个有经验的实验人员来帮助您。
离心结束后,您应当会看见您的生物学样品位于离心管底部的沉淀中。它已经从称为上清的余液中分离出来了。
可以通过倾倒,也就是直接倒出来去除上清,15ml离心管,也可将上清吸出,就是用真空吸力将其吸出。
纯化的样品可以被重新放回溶液中,这个过程称之为重悬。重复离心细胞,然后吸出上清留下细胞,再用缓冲液重悬细胞,这个过程称之为细胞洗涤。
●打开水浴锅加热至37℃。
● 超净台上放好离心管(离心管规格选用15ml的),细胞培养瓶,移液管,紫外灭菌至少20至30分钟,吹风5至10分钟除去臭氧。
● 37℃预热好要复苏细胞的培养液,也可以不用预热培养液,根据细胞情况选择。
●向离心管中加约5至10ml培养液,从液氮罐或-80℃中取出冻存细胞,立即将冻存管放入37℃水浴中并轻轻摇动,待融化后(约2min即可)立即将解冻的细胞转移至含培养液的离心管中,800-1000rpm下离心5min,弃上清,玻璃离心管,加适量完全培养液轻轻吹打重悬细胞后转移至细胞培养瓶中,轻晃使瓶底液体分散均匀,标好细胞名称、代数、复苏日期,丽水离心管,显微镜下观察后放入37℃,进口离心管,5%co2培养箱中。一般贴壁细胞过夜即可贴壁,换液和传代时间根据不同细胞生长情况而定。
当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时,此离心力“f”由下式定义, 即: f = ma = mω2 r a — 粒子旋转的加速度,m — 沉降粒子的有效,ω—粒子旋转的角速度,r—粒子的旋转半径( cm )。 通常离心力常用地球引力的倍数来表示,因而称为相对离心力“ rcf ”。或者用数字乘“g”来表示 例如25000×g,则表示相对离心力为25000。
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