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人环磷酸腺苷 c--- elisa-武汉纽斯特(商家)

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    2022-9-12

黄经理
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对于生长的组织培养液中的细胞,首先移除培养基,然后加入0.1m hcl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解;如果裂解不充分,接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心,收集上清直接用于实验。临用前在0.1m hcl中加入0.1%至1%浓度的triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内,去污剂并不干扰试验的结合部位,但是会适度的增加光密度值。含有triton的样品需利用标准曲线估计浓度,为了较精l确的测定,标准曲线需以相同方式稀释。取1 ml细胞培养上清加入10μl浓-,600g离心力于室温离心,上清液直接用于实验测定分析。






结果计算

样品中camp浓度有多种计算方法。x轴表示camp标准品浓度,y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。

1 样品和标准品的净光密度(od)平均值的计算:

净od平均值 = od平均值 - nsb孔od平均值

2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(b0孔)的百分比,计算公式 如下:

百分比值 = (净od平均值/ b0孔od平均值)×100

3 绘制净od平均值或百分比值对camp标准品浓度的logit-log曲线。通过插值即可得到样品中camp浓度。


武汉纽斯特生物科技有限公司(wuhanneweastbiotechonologyco.ltd),系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在的子公司。公司位于武汉东湖-开发区光谷生物城.美国neweastbio-于生命科学和生物技术领域,人环磷酸腺苷 c- elisa,主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等,与高校和研究所、大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往。







体外用gtpγs/gdp处理蛋白以用作阳性和阴性的对照

注意:在细胞体内环境条件下大约有10%的ras被激l活,而在体外用gtpγs处理大约有90%的ras被激l活。

1.        

准备两个离心管,每个管中各加入0.5 ml的细胞提取物(如果是纯的ras蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug)。

2.        

每个管中加入20ul 0.5m edta(终浓度即为20 mm)。

3.        

一个管中加入5ul的100x gtpγs(终浓度即为100 um)作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100x gdp(终浓度即为1 mm)作为阴性对照。

4.        

将离心管置于30°c条件下反应30 min并不断搅动。

5.        

终止反应:将管置于冰上并加入32.5ul 1m mgcl2(终浓度即为60mm)。







人环磷酸腺苷 c- elisa-武汉纽斯特(商家)由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司位于湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城b3-3栋3楼。在市场经济的浪潮中拼博和发展,目前武汉纽斯特在生物化工中享有-的声誉。武汉纽斯特取得-商盟,标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。武汉纽斯特全体员工愿与各界有识之士共同发展,共创美好未来。


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