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分子实验介绍——荧光定量pcr检测

荧光定量pcr是检测生物样品中rna含量的普遍的方法，通过荧光染料或荧光标记的特-的探针，对pcr产物进行标记-，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。目前主要使用sybr green和taqman法对rna含量进行检测。sybr green在低样本量时成本较低，目前选用的较多。

sybr green i是一种只与dna双链结合的荧光染料。当它与dna双链结合时，发出荧光；从dna双链上释放出来时，荧光信号急剧减弱。因此，在一个体系内，其信号强度代表了双链dna分子的数量。sybr green荧光染料法定量pcr的基本过程是：1、开始反应，当sybr green染料与dna双链结合时发出荧光。2、dna变性时，sybr green染料释放出来，荧光急剧减少。3、在聚合延伸过程中，引物退火并形成pcr产物。4、聚合完成后，sybr green染料与双链产物结合，定量pcr系统检测到荧光的净增量加大。

实验流程：细胞或组织rna提取-rna浓度检测-rna逆转录-定量pcr检测。

结果示例：

图 a 基因扩增曲线图；b 基因扩增溶解曲线图；c mrna相对表达量变化

从图中可以扩增曲线可以看出目的rna扩增效果，溶解曲线可以看出引物识别特-情况，通过使用δδct方法计算可以得到每个组中目的mrna表达变化。

凝胶阻滞迁移电泳检测服务（emsa）

凝胶迁移或电泳迁移率实验（electrophoretic mobility shift assay，emsa）是一种研究dna/rna结合蛋白和其相关的dna/rna结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。依据实验需要，蛋白双向电泳试验，设计标记探针、非标记探针、蛋白特-抗ti等参照物，基于dna-蛋白质或rna-蛋白质复合体在聚bing烯-凝胶电泳（page）中有不同迁移率的原理，当转录因子与特异的dna或rna结合后，其在page中的迁移率将小于未结合-白转录因子的dna，从而检测到活化的与dna或rna结合的蛋白转录或调节因子。

分子生物学检测

分子生物学作为现代生物技术中zui为-的实验手段之一，已经广泛渗透到生命科学的各个领域，在基础研究、医l疗诊断等领域均起到了非常重要的作用。

     借助-技术优势，英瀚斯生物特配备了高l效的仪器设备，如slan 48p 荧光定量pcr检测系统、pcr仪、电泳仪、冷冻离心机、高速离心机等。目前公司可为您提供反转录pcr、荧光定量pcr、凝胶电泳迁移率等检测服务，-缩短您的实验周期、降低您的实验成本。

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