在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升、渗透压改变、脱水、ph改变、蛋白变性等,200-074-400冻存袋供应商,能引起细胞。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的-条件下,能使细胞内水份在-前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。
1. 首先准备-于包装样本的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样本编号。
2. 准确切除所需组织后,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。
3. 在rnase-free 的生理盐水中迅速漂洗样本,以去除血渍和污物。
4. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织,cs50冻存袋供应商,迅速投入液氮冷却。
5. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。
生长-之培养细胞、新鲜培养基、dmso、无菌塑料冷冻保存管(nalgene 5000-0020)、等速降温机
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟->;-20℃30分钟->;-8o℃16~18小时(或隔夜)->;液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时,200-074-400冻存袋供应商,以防止胞内冰晶过大,冻存袋供应商,造成细胞大量消失,亦可跳过此步骤直接放入-8o℃冰箱中。
(2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-8o℃以下) -120℃,再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
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