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---微生物分析方法验证-世纪久海-微生物分析方法验证

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    2022-8-26

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微生物限度检查





计数方法适用性试验中,采用平皿法或薄膜过滤法时,-微生物分析方法验证,试验组菌落数减去供试品对照组菌落数的值与菌液对照组菌落数的比值应在0.5~2范围内;采用mpn法时,试验组菌数应在菌液对照组菌数的95%置信限内。若各试验菌的回收试验均符合要求,照所用的供试液制备方法及计数方法进行该供试品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数。

   方法适用性确认时,若采用上述方法还存在一株或多株试验菌的回收达不到要求,那么选择回收接近要求的方法和试验条件进行供试品的检查。

   供试品检查

   检验量

   检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml或c㎡)。

   一般应随机抽取不少于2个zui小包装的供试品,混合,取规定量供试品进行检验。

   除另有规定外,一般供试品的检验量为10g或10ml;膜剂为100c㎡;贵重-、微量包装-的检验量可以酌减。检验时,应从2个以上zui小包装单位中抽取供试品,工作台微生物分析方法验证,大蜜丸还不得少于4丸,膜剂还不得少于4片。

   供试品的检查

   按计数方法适用性试验确认的计数方法进行供试品中需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的测定。

   胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基用于测定需氧菌总数;沙氏-琼脂培养基用于测定霉菌和酵母菌总数。

   阴性对照试验 以稀释液代替供试液进行阴性对照试验,阴性对照试验应无菌生长,如果阴性对照有菌生长,应进行偏差调査。




-效力

根据产品类型,在供试品刚接种(0时)及表2规定的间隔时间,分别从上述每个容器中取供试品1ml(g),用ph7.0无菌--蛋白胨缓冲液稀释成1:10、1:102、1:103等稀释级。采用平皿法(照附录? j微生物限度检查法,其中测定-用胰酪胨大豆琼脂培养基,测定-用沙氏-琼脂培养基)测定每份供试品中所含的菌数。

8.6.2根据菌数测定结果,空气微生物分析方法验证,计算1ml(g)供试品各试验菌所加的菌数及各间隔时间的菌数,并换算成lg值。




















4、富集培养法

富集培养法的方法和原理非常简单。我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长,微生物分析方法验证,在这些条件下,所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争,在生长能力方面远-过其他微生物。如果要分离一些专性寄生菌,就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中,使其大量生长。通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。

5、厌氧法

在实验室中,为了分离某些yanyangjun,可以利用装有原培养基的试管作为培养容器,把这支试管放在沸水0浴中加热数分钟,以便逐出培养基中的溶解氧。然后快速冷却,并进行接种。接种后,加入无菌的石蜡于培养基表面,使培养基与空气隔绝。另一种方法是,在接种后,利用n2或co2取代培养基中的气体,然后在火焰上把试管口密封。有时为了更有效地分离某些yanyangjun,可以把所分离的样品接种于培养基上,然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。

6、单细胞(或单孢子)分离法

是采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。较大的微生物,可采用毛细管提取单个个体。个体相对较小的微生物,需采用显微操作仪,在显微镜下用毛细管或显微zhen、钩、环等挑取单个微生物细胞或孢子以获得纯培养。单细胞分离法对操作技术有比较高的要求。




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