培养基适用性检查
微生物计数用的商品化的预制培养基、由脱水培养基或按配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
学习:类似于无菌检查法,此处将“成品培养基”修改为“商品化的预制培养基”,表述,下文还有,不再赘述。
计数方法适用性试验
供试液制备
根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不应超过45°c。供试液从制备至加人检验用培养基,不得超过1小时。
学习:此处应注意同时进行数个品种计数方法适用性试验时的时效问题。“供试液制备”这一节,水溶性供试品、水不溶性非油脂供试品、油脂类供试品的制备方法无变化。在2020版药典中,将原“(4)需用特殊方法制备供试液的供试品”中的小类(四种)提升至与上述3类并列表述,除气雾剂供试品外,制备方法无变化。具体是膜剂供试品、肠溶及结肠溶制剂供试品、气雾剂供试品(2015版:气雾剂、-供试品)、贴剂、贴膏剂供试品(2015版:贴膏剂供试品)。
计数方法适用性试验
1.供试液制备
根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时,-微生物限度检查公司,应均匀加热,且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基,不得超过1 小时。
常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用,应建立其他适宜的方法。
(1)水溶性供试品 取供试品,用ph7.0无菌--蛋白胨缓冲液,或ph7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液。若需要,微生物限度检查公司,调节供试液ph值至6~8。-时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
(2)水不溶性非油脂类供试品 取供试品,用ph7.0无菌--蛋白胨缓冲液,或ph7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基制备成1:10供试液。分散力较差的供试品,可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80,使供试品分散均匀。若需要,调节供试液ph值至6~8。-时,空气微生物限度检查公司,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。
(3)油脂类供试品 取供试品,加入无菌十四烷酸-酯使溶解,表面微生物限度检查公司,或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无-性的无菌表面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40℃(特殊情况下,zui多不超过45℃),小心混合,若需要可在水浴中进行,然后加入预热的稀释液使成1:10供试液,保温,混合,并在zui短时间内形成乳状液。-时,用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。
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