配制培养基注意事项
1.灭菌时严格按照规定加热、加压,切忌时间过长压力过高,否则会造成营养成分的破坏。
2.切忌使用铜锅、铁锅配制培养基。
3.培养基不能二次高压灭菌。
4.划线用培养基可放入冰箱或培养箱除去水分。
无菌操作注意事项
1.进入无菌室之前-行空气消毒,工作人员进入无菌室以前,必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。
2.动作要轻,尽量减少走动,以免搅动空气。
3.操作要靠近酒精灯火焰区,人手微生物限度检查咨询,使用吸管要用吸球。
4.接种环/接种针用前用后进行火焰灭菌。
5.工作结束作好终末消毒,所有培养物均应高压灭菌后再扔掉,以免污染环境。
(3)mpn法 mpn法的精密度和准确度不及薄膜过滤法和平皿计数法,空气微生物限度检查咨询,仅在供试品需氧菌总数没有适宜计数方法的情况下使用,本法不适用于霉菌计数。若使用mpn法,按下列步骤进行。
取照上述“供试液的制备”“接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液至少3个连续稀释级,每一稀释级取3份1ml分别接种至3管装有9~10ml胰酪大豆胨液体培养基中,同法测定菌液对照组菌数。-时可在培养基中加入表面活性剂、中和剂或灭活剂。
接种管置30~35℃培养3天,微生物限度检查咨询,逐日观察各管微生物生长情况。如果由于供试品的原因使得结果难以判断,可将该管培养物转种至胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基,在相同条件下培养1~2 天,观察是否有微生物生长。根据微生物生长的管数从表3查被测供试品每1g或每1ml中需氧菌总数的可能数。
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