elisa操作步骤复杂,影响反应因素较多。
测定大分子量物质的夹心法elisa,标准曲线的范围一般较宽,camp/c- -测,曲线zui高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈s形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是zui理想的检测区域。
常用的elisa可以分为以下五大类:直接elisa;间接elisa;夹心elisa;竞争elisa;竞争抑制elisa。其他的elisa都隶属于这五类elisa或由这五类elisa组合衍生。
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不管是哪一种elisa,它的操作都由以下几种基本的操作组合而成:将抗原或抗体吸附到固相载体上;加入待检样品以及后续试剂;温育;洗涤去掉游离未结合的反应物;加入酶检测底物;结果的判读。
elisa操作步骤复杂,影响反应因素较多。
测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。
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