胰蛋白酶-edta溶液(0.25%:0.02%)
产品简介:
胰蛋白酶(trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到-后,-内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在-工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为-酸,其适温度约为 37℃。
trypsin-edta solution(0.25%:0.02%)由 0.25%胰酶、0.02íta 等组成,经过滤-。本试剂可以直接用于培养细胞的-,或者一些组织的-,通常室温下 1min 左右就可以-下大多数贴壁细胞。
自备材料:
1、pbs、hanks 液或无血清培养液
2、显微镜
3、离心机
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的-
吸除培养液,用无菌 pbs、hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。加入少量 trypsin-edta solution,略-细胞即可,室温放置 0.5~2min,不同的细胞-时间有所不同。
显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞-液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
如果发现-不足,则加入 trypsin-edta solution 重新-。
如果发现细胞-时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞-液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的-
不同的组织需要-的时间相差很大,通常以-后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1、尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2、在使用 trypsin-edta solution 过程中,要-注意避免-液被-污染。
3、trypsin-edta solution -细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴-手套操作。
本公司主营: ELISA试剂盒 - 试剂盒 - 检测试剂盒 - 酶联免疫试剂盒 - ELISA Kit
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