通用细胞冻存液
产品简介:
随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。冷冻保存细胞系的优点如下:1、减少基因漂移;2、减缓细胞系的衰老;3、稳定表型;4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应-复苏时低温保护剂获得 1:10~1:20 的稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释 10~20 倍以后,该浓度一般丌会对细胞造成毒性损伤。
通用细胞冻存液主要由 fbs、dmso 等组成,是非常-的一种无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。
自备材料:
1、细胞计数器
2、细胞冻存管
3、-温冰箱或液氮
4、超净工作台
操作步骤(仅供参考):
1、培养细胞至对数生长晚期,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态-的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶-并用完全培养基终止-,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。
2、500~1000g 离心 5min,弃上清。
3、加入适量的通用细胞冻存液,重悬细胞,使细胞浓度达到 1~10×106/ml,置于冻存管
中,密闭、丌要拧的太紧,避免弯曲变形。
4、一般遵循 1℃/min 的速率进行冷冻。亦可采用 4℃ 20min,-20℃ 30min,-70℃ 过夜,-置于液氮罐中长期存储。
注意事项:
1、注意在超净工作台内无菌操作,尽量避免污染。
2、初次使用融化后可在 4℃保存 1 个月,但应减少反复冻融的次数,以免失效。
3、杂交瘤细胞冻存时应定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴-手套操作。
本公司主营: ELISA试剂盒 - 试剂盒 - 检测试剂盒 - 酶联免疫试剂盒 - ELISA Kit
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