peg8000-mgcl2溶液(40%,无菌)
产品简介:
-(polyethylene glycol ,peg)有众多品种,常见的有 peg400、peg1500、peg4000、peg6000、peg8000 等,-系列产品-、无-性,味微苦,具有-的水溶性,并与许多有机物组份有-的相溶性,具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等,在化妆品、制药、化纤、橡胶、塑料、造纸、油漆、电镀、-、金属加工及食品加工等行业中均有着-广泛的应用。依相对分子不同而性质不同,从无色无臭黏稠液体至蜡状固体。分子量 200~600 者常温下是液体,分子量在 600 以上者就逐渐变为半固体状,随着平均分子量的不同,性质也有差异。从无色无臭粘稠液体至蜡状固体。随着分子量的增大,其吸湿能力相应降低。其中 peg4000 和 peg6000 常用于促进细胞融合或原生质体融合并有助于生物体(如酵母菌)在转化中摄入 dna。
peg8000-mgcl2 溶液(40%,无菌)主要由 peg8000(cas 号 25322-68-3)、-等组成,其作用原理使能够改变各类细胞的膜结构,使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,两细胞接口处在双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用下,细胞发生融合,该试剂经严格无菌处理,仅用于科研领域,不用于-诊断或-。
自备材料:
1、mem 培养基、胎牛血清
2、co2 培养箱、离心机
3、hat、ht、a media supplement
4、胰蛋白酶-液
操作步骤(仅供参考):
1、如果变成胶冻状,可 37~60℃水浴使其变成溶液。
2、如果用于杂交则按如下步骤:将杂交前体细胞以相同数量(5×104/ml)接种,以适当的培养基培养细胞,待细胞贴壁扩展至汇合成片(80%汇合率)的密度。吸干培养液,加入2ml peg8000-mgcl2 溶液(40%,无菌),轻轻转动 1min 使 peg8000 溶液覆盖所有细胞。静置 1min,加入 5ml 完全 mem 培养液以稀释 peg8000 溶液,吸干净稀释的peg8000 溶液,再用 5ml mem 培养液洗涤被 peg 处理的细胞。吸干净洗液,加入 5ml mem 培养液,37℃ 5%co2 培养过夜。24~48h 后先吸去培养液,加入胰酶-液处理细胞,待细胞-后吸除胰酶-液,用 hat 选择培养剔除 hprt 和 tk 缺陷细胞。弃上清液,用补加 1×ht 和 1×a 的完全培养液重新悬浮细胞。融合 12~24h 后进行异核体分析,杂交前体细胞在 4~5 天内发生死亡,对于大多数融合前体细胞而言,10~14天可见杂交细胞-。
注意事项:
1、应注意无菌操作,避免被微生物污染。
2、peg8000-mgcl2 溶液(40%,无菌))较为粘稠时,可 37~60℃水浴使其变成溶液。
3、体外培养的单层贴壁细胞或悬浮细胞均可做融合,但成功概率较大的是单层贴壁细胞。
4、如需 hat 选择系列产品,可选择 a media supplement(50×)、ht mediasupplement(50×)、hat media supplement(50×)。
本公司主营: ELISA试剂盒 - 试剂盒 - 检测试剂盒 - 酶联免疫试剂盒 - ELISA Kit
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